免疫組化結(jié)果需結(jié)合染色強度、陽性細胞比例及組織定位綜合判斷，主要觀察指標有陽性標記物表達水平、陰性對照有效性、組織學背景一致性、臨床病理相關(guān)性、技術(shù)質(zhì)量控制。
1、陽性標記物表達水平
陽性標記物的染色強度分為弱陽性、中度陽性和強陽性三級，需與陰性對照比較。細胞膜、細胞質(zhì)或細胞核的特異性著色具有診斷意義，如ER陽性乳腺癌細胞核出現(xiàn)棕色顆粒為典型表現(xiàn)。不同抗體陽性標準不同，如HER2免疫組化3+為強陽性膜染色且占比超過10%。
2、陰性對照有效性
陰性對照組織應無特異性染色，內(nèi)對照如正常上皮需顯示預期染色模式。若陰性對照出現(xiàn)非特異性著色，可能因抗體濃度過高或組織固定不當導致，需重新優(yōu)化實驗條件。內(nèi)源性過氧化物酶阻斷不徹底可造成背景染色干擾判斷。
3、組織學背景一致性
陽性信號需與形態(tài)學特征吻合，如CD20應限于B細胞膜表達。異常定位如細胞角蛋白在淋巴細胞中表達提示交叉反應或假陽性。腫瘤異質(zhì)性區(qū)域需多點觀察，避免因取樣誤差導致漏診。
4、臨床病理相關(guān)性
結(jié)果需與HE染色形態(tài)和臨床病史相互印證，如前列腺癌PSA陽性但臨床無前列腺病變需考慮轉(zhuǎn)移癌可能。多項標志物組合解讀更可靠，如GATA3、GCDFP15協(xié)同判斷乳腺癌來源。
5、技術(shù)質(zhì)量控制
組織固定時間應控制在6-72小時，過度固定導致抗原丟失。切片厚度宜保持3-5微米，脫片修復液pH值需匹配抗體要求。每批次實驗應包含已知陽性和陰性對照標本驗證試劑有效性。
獲取免疫組化報告后應及時與病理醫(yī)師溝通，重點關(guān)注診斷性標志物的具體表達模式和量化評分。對于臨界值結(jié)果如HER2 2+建議加做FISH檢測，存在技術(shù)疑問時可要求重復實驗或送第三方實驗室復核。日常工作中需定期校準自動化染色設備，建立標準操作流程減少人為誤差，同時注意抗體克隆號、稀釋度等關(guān)鍵參數(shù)的記錄存檔，便于結(jié)果溯源和實驗室間比對。