新型冠狀病毒感染的核酸檢測(cè)方法主要有實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)、恒溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)、核酸雜交檢測(cè)、高通量測(cè)序和快速抗原檢測(cè)。
實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)是目前新型冠狀病毒感染確診的金標(biāo)準(zhǔn)。該方法通過采集鼻咽拭子、口咽拭子或痰液等樣本,提取其中的病毒核酸,利用逆轉(zhuǎn)錄酶將病毒核糖核酸轉(zhuǎn)化為互補(bǔ)脫氧核糖核酸,再通過聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)進(jìn)行特異性擴(kuò)增,并借助熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物。該技術(shù)靈敏度高、特異性強(qiáng),能夠準(zhǔn)確判斷樣本中是否存在新型冠狀病毒的特定基因片段,是診斷新型冠狀病毒感染的主要依據(jù)。檢測(cè)通常在具備資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,需要專業(yè)的儀器設(shè)備和人員操作。
恒溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)是一種不依賴溫度循環(huán)的核酸擴(kuò)增技術(shù),例如環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。該方法在恒定溫度下即可完成核酸的指數(shù)級(jí)擴(kuò)增,反應(yīng)過程簡(jiǎn)單快速。與實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)相比,恒溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)對(duì)儀器設(shè)備的要求相對(duì)較低,部分技術(shù)可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè),縮短了檢測(cè)時(shí)間。其檢測(cè)靈敏度也較高,適用于特定場(chǎng)景下的快速篩查。但操作過程中需嚴(yán)格防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性結(jié)果。
核酸雜交檢測(cè)基于堿基互補(bǔ)配對(duì)原理,利用標(biāo)記的核酸探針與目標(biāo)病毒核酸序列進(jìn)行特異性結(jié)合。常見的如微陣列芯片技術(shù),可將多種病毒的特異性探針固定于芯片上,一次檢測(cè)可同時(shí)篩查多種病原體。該方法通量高,但通常需要先對(duì)樣本中的核酸進(jìn)行擴(kuò)增以提高檢測(cè)靈敏度。部分基于雜交原理的快速檢測(cè)試紙條,操作簡(jiǎn)便,可實(shí)現(xiàn)肉眼判讀結(jié)果,但靈敏度和特異性可能略低于基于擴(kuò)增的方法,多用于輔助診斷或初篩。
高通量測(cè)序技術(shù),如下一代測(cè)序,可以對(duì)樣本中的所有核酸序列進(jìn)行無偏倚的測(cè)定。該方法不依賴于已知的病原體序列,能夠發(fā)現(xiàn)新的或變異的病毒株,對(duì)于病毒溯源、變異監(jiān)測(cè)和未知病原體鑒定具有重要價(jià)值。在新型冠狀病毒感染診斷中,高通量測(cè)序主要用于復(fù)雜病例的確診、病毒基因組分析以及監(jiān)測(cè)病毒變異情況。由于其成本高、數(shù)據(jù)分析復(fù)雜、耗時(shí)較長,通常不作為常規(guī)臨床診斷的首選方法,而是用于科研和公共衛(wèi)生監(jiān)測(cè)。
快速抗原檢測(cè)是通過檢測(cè)樣本中是否存在新型冠狀病毒的特異性蛋白抗原來判斷感染情況。通常采用膠體金免疫層析法等技術(shù),將樣本滴加到檢測(cè)卡上,通過抗原與標(biāo)記抗體的結(jié)合在試紙條上顯色。該方法操作簡(jiǎn)便,無需特殊儀器,15至20分鐘左右即可獲得結(jié)果,適合家庭自測(cè)、基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)篩查或疫情現(xiàn)場(chǎng)的快速排查。但其靈敏度通常低于核酸檢測(cè),尤其在病毒載量較低的感染早期或恢復(fù)期可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果,因此陽性結(jié)果具有提示意義,但確診仍需以核酸檢測(cè)為準(zhǔn)。
選擇何種檢測(cè)方法需根據(jù)檢測(cè)目的、場(chǎng)所條件、時(shí)效要求和準(zhǔn)確性需求綜合決定。對(duì)于出現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽、咽痛等疑似新型冠狀病毒感染癥狀的個(gè)體,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行核酸檢測(cè)以明確診斷。在日常生活中,應(yīng)注意佩戴口罩、勤洗手、保持社交距離、經(jīng)常開窗通風(fēng),并積極接種疫苗,這些措施是預(yù)防感染的有效手段。若自測(cè)抗原陽性或核酸檢測(cè)陽性,應(yīng)根據(jù)相關(guān)指南進(jìn)行居家隔離或治療,密切監(jiān)測(cè)病情變化,如出現(xiàn)呼吸困難、胸痛、意識(shí)模糊等嚴(yán)重癥狀,須立即就醫(yī)。
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