核酸檢測(cè)陽(yáng)性的原因都有哪些?核酸檢測(cè)為什么會(huì)呈假陽(yáng)性
導(dǎo)致核酸檢測(cè)出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因很多,像標(biāo)本的污染、試劑的污染、擴(kuò)增產(chǎn)物的污染、氣溶膠污染以及實(shí)驗(yàn)室中克隆質(zhì)粒污染等都可能會(huì)影響核酸檢測(cè)結(jié)果,導(dǎo)致其出現(xiàn)假陽(yáng)性,具體如下:
1、標(biāo)本污染
核酸檢測(cè)采樣人員在收集標(biāo)本時(shí)容器被污染,或者在放置標(biāo)本時(shí),如果容器密封不嚴(yán)病毒外泄,容器與容器之間會(huì)發(fā)生相互交叉污染。其次醫(yī)生在提取核酸模板時(shí),如果加樣器污染也會(huì)導(dǎo)致要本間發(fā)生污染的情況發(fā)生。
2、PCR試劑污染
PCR試劑在調(diào)配的過(guò)程中,有可能被雙蒸水、加樣槍、容器等污染。
3、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染
PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染是一種最常見的污染問(wèn)題,PCR產(chǎn)物的拷貝量大于1013copy/mL,即使被很少量的PCR產(chǎn)物污染,就會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性的發(fā)生。
4、氣溶膠污染
空氣與離心機(jī)離心和液體表面進(jìn)行摩擦?xí)r,由于操作比較劇烈,醫(yī)生在反復(fù)吸樣和開蓋時(shí)就會(huì)導(dǎo)致氣容膠發(fā)生污染。氣溶膠中的小顆粒會(huì)分散在實(shí)驗(yàn)室的空氣中,可能會(huì)落到PCR儀、驗(yàn)臺(tái)面、吸頭盒等地方,形成叉感染。
5、實(shí)驗(yàn)室中克隆質(zhì)粒污染
實(shí)驗(yàn)室中的克隆質(zhì)粒在被純化時(shí)需要的用具和試劑比較多,而且在活細(xì)胞內(nèi)質(zhì)粒,活細(xì)胞的繁殖速度更快,其生命力更強(qiáng),造成污染的可能性也就更大一些。
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